Ифа: что за исследование, когда и как проводится, и что показывает?

Виды иммуноглобулинов

Все антитела делятся на несколько видов, исходя из того, на какой из стадий иммунного ответа они образуются.

Первыми в игру вступают иммуноглобулины класса М, которые обозначаются аббревиатурой IgM. Данные соединения вырабатываются на стадии проникновения в организм инфекции. Как правило, максимальные их значения в крови диагностируются в первый-третий дни заболевания.

Как только инфекция распространилась по тканям и органам, иммунная система начинает вырабатывать антитела класса G. Они отвечают за уничтожение антигенов, которые попали в организм, вплоть до полной победы над ними. Данные соединения продолжают находиться в теле человека длительное время, циркулируя по крови и обеспечивая стойкий иммунитет к тому или иному заболеванию. На этом факторе и основывается вакцинация. Вакцинные препараты содержат образцы антигенов – ослабленные и убитые микробы или вирусы, их части, искусственно синтезированные патогенные белки. При выполнении прививки в теле человека вырабатывается большое количество иммуноглобулинов IgG, которые при встрече с реальным возбудителем болезни смогут уничтожить его в короткий срок или существенно снизить нанесённый ним вред.

Иммуноглобулины класса А содержатся в слизистых оболочках и предотвращают дальнейшее проникновение инфекции, а антитела IgE защищают от инфекционных болезней, вызванных паразитами.

Для лабораторных исследований значимыми являются иммуноглобулины классов М, G и А. Оценка их количества позволяет сделать вывод о стадии инфекционного процесса и интенсивности его протекания. Кроме того, эти показатели информативны для подтверждения факта перенесённого заболевания – например, краснухи, ветряной оспы или гепатита А.

Принцип ИФА и сходство с ПЦР

Помимо ИФА, есть много лабораторных исследований, показывающих наличие заболевания. Иммуноферментный анализ стал современной заменой бактериальным посевам, проведение и интерпретация результатов которых занимали 3-5 дней. В течение этого времени врачам приходилось действовать вслепую. ИФА позволило медицине перейти на новый уровень.

Лаборатория делает комплексное исследование крови на всевозможные антигены и антитела, которые предполагает врач, всего за несколько часов. Иммуноферментный анализ крови и расшифровка результатов занимают некоторое время, но не более суток. Для этого в лабораторных условиях воспроизводится реакция «антиген-антитело» с применением имеющихся реактивов. Это позволяет определить, есть ли в исследуемом образце биологического материала соответствующее соединение. ИФА показывает, в какой стадии развития находится инфекционное заболевание, но не может рассказать о возбудителе. Такие данные может дать только полимеразная цепная реакция.

Суть этого метода – в выявлении непосредственного возбудителя. ИФА и ПЦР имеют некоторые сходства, но со стороны профессиональной лабораторной диагностики представляют абсолютно разные методы анализа. Таким образом, ИФА может показывать продукты жизнедеятельности возбудителей, а ПЦР – самого «виновника» болезни. Данная информация может значить только одно – комплексное использование лабораторных методов позволяет быстрее идентифицировать заболевание и начать лечение пациента.

Иммуноферментный анализ – что это такое?

Исследование методом ИФА на антитела – аналитический способ определения различного типа вирусов, инфекций, паразитов, онкомаркеров.

Применение данной методики обладает следующими преимуществами:

• высокая специфичность;
• высокая чувствительность;
• минимальные сроки изучения материала;
• минимум времени на проведение теста;
• точность результатов;
• большое разнообразие тест-систем.

Но также у данного метода есть некоторые недостатки. К примеру, проводить иммуноферментный анализ гепатита есть смысл только в том случае, если врач имеет представление о природе патологии.

“Угадать” диагноз при помощи данного исследования не получится. Кроме того, при инфекции, анализ не сможет найти возбудителя и определить его возможности. Он только укажет на наличие специфических антител в организме. Из-за высокой стоимости, прибегать к нему необходимо лишь при определенных условиях, а расшифровку результатов можно доверить только опытному врачу.

Реакция иммуноферментного анализа предоставляет больше 95% точности при постановке диагноза. В процессе проведения теста устанавливаются антитела разных типов – иммуноглобулины нескольких классов.

Например, антитела класса А свидетельствуют о наличии хронической инфекции, они исчезают из крови в течении пары недель, причем только 20% из них присутствует в сыворотке крови. Антитела класса G проявляются только через несколько недель и могут задерживаться в организме на протяжении многих лет.

Отдельный тип исследования – это гемотест, который помогает обнаружить в крови аллергены и установить их тип.

Особенности проведения анализа

Иммуноферментный анализ крови на паразитов, инфекции и гормоны может быть проведен разными методиками, а для исследования используются различные мазки, отпечатки органов, срезы.

На данный момент доступны следующие способы:

• Прямой метод. На фиксированный препарат наносят антитела к предполагаемому вирусу, выреживают несколько часов, отмывают специальным раствором, высушивают, наносят субстрат и еще раз промывают. При наличии вируса или инфекции, в материале заметны следы желто-коричневого цвета;
• Непрямой анализ ИФА. В этом случае на фиксированный препарат наносят сыворотку, выреживают, подсушивают, промывают, наносят фермент, далее опять подсушивают. В остальном процедуру проходит, как и в прямом методе.

Количественный метод ИФА назначается врачом, чтобы определить концентрацию определенного гормона или при подозрении на определенную инфекцию. Также этот способ позволяет оценить особенности развития инфекционного процесса. Качественный метод показывает присутствует искомое вещество в организме или нет.

Механизм анализа ИФА выглядит следующим образом:

1. Для начала врачу нужно получить образец материала для изучения, обычно используется сыворотка крови.
2. У лаборантов есть готовые образцы возбудителя или антител, в которые и помещается материал пациента.
3. При контакте образуются или не образуются иммунные комплексы.
4. Инструментальное изучение плотности позволяет сделать вывод и интерпретировать результаты.

Согласно принципам проведения анализа, для исследования забирают кровь из вены, обычно натощак, рано утром. За сутки до этого стоит исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Рекомендуется сдать тест для определения хронических и острых заболеваний:

• гепатиты всех типов;
• вирус иммунодефицита человека;
• герпес;
• токсоплазмоз;
• корь, краснуха, дизентерия, энцефалит (больше о ТОРЧ-анализах при беременности можно узнать из статьи);
• паразитарные болезни;
• инфекции, передающие при половом контакте.

Кроме того, назначить данный тип исследования могут при подозрении на сепсис, цирроз печени, рак, хроническую пневмонию, на аутоиммунные заболевания, для общей оценки иммунитета человека и определения концентрации гормонов.

Подготовка

Иммуноферментный анализ необходимо проводить, придерживаясь рекомендаций врача, т.к. на результаты исследования часто влияют разные внешние факторы. Основные правила подготовки к ИФА:

• венозную кровь надо сдавать строго натощак (в норме, последний прием пищи должен быть за 12 часов до исследования);
• необходимо накануне проведения анализа исключить прием любых лекарственных препаратов (если пациент принимает антигистаминные (противоаллергические) средства, следует проконсультироваться с доктором о том, за сколько до начала ИФА надо их отменить);
• нельзя перед обследованием курить и пить алкогольные напитки, т.к. это негативно повлияет на результат;
• следует обязательно выспаться перед анализом;
• надо исключить любые физические нагрузки, стрессовые факторы;
• диагностика большинства гормонов женской репродуктивной системы потребует взятия крови в определенные дни менструального цикла.

Расшифровка результатов

Расшифровка результатов анализов на иммуноферменты определяется количественными качественными показателями.

При качественном определении результат может быть положительным (знак «+»), что означает возможное протекание патологического процесса либо отрицательным (знак «-«), что свидетельствует об отсутствии инфекционных возбудителей.

Количественное определение направлено на выявление активности антител и их классов (IgM, IgG, IgA):

• IgM (+) – в организме протекает острый инфекционный процесс;
• IgM (-) – отсутствие конкретного возбудителя либо переход инфекционного процесса в хроническую стадию;
• IgM (+) и IgA (+) – одновременное присутствие таких положительных результатов говорит об острой фазе заболевания;
• IgA (+) и IgM (-) – скрыто протекающая либо хроническая инфекция;
• IgG (+) – перетекание заболевания в хроническую стадию либо переход к выздоровлению (выработан иммунитет к инфекционному агенту);
• IgG (-) и IgM (+)- недавнее инфицирование и острое течение патологического процесса;
• IgM (+) и IgG (+) – давнее заражение и обострение инфекционного процесса.

Количественные значения возможны в разных интерпретациях и несут большую информационную нагрузку, поэтому трактовать их может только высококвалифицированный специалист. Самостоятельная оценка таких данных невозможна.

С помощью данного анализа можно поставить точный диагноз и добиться своевременного и эффективного лечения заболевания

Иммуноферментный анализ позволяет наиболее максимально и информативно обследовать пациента, что помогает сократить время диагностики, а значит быстрей начать необходимое лечение и ускорить процесс выздоровления.

История создания и развития ИФА

Данный метод исследования крови стал применяться в практической медицине еще в середине прошлого столетия – где-то в 60-х годах. Изначальной его целью были научные исследования в области гистологии, которые ограничивались поиском и изучением клеточной антигенной структуры биологических видов. Анализ крови методом ИФА основан на взаимодействии родственных антигенов (АГ) и специфических антител (АТ), с формированием комплекса «антиген-антитело», определяемого ферментом.

Такой феномен подтолкнул ученых к решению, что способ можно применять для распознавания белковых соединений различных классов, образующихся в сыворотке крови при попадании в организм возбудителя. Из-за своей непосредственной вовлеченности в функционирование иммунной системы эти соединения получили название иммуноглобулины (ИГ, Ig), а открытие стало величайшим прорывом в лабораторной диагностике.

При этом активно использовать этот высокочувствительный метод стали лишь в 80-х годах, и доступен он был только в узкоспециализированных медицинских учреждениях. Самыми первыми получили возможность пользоваться иммуноферментными анализаторами станции и центры переливания крови, венерологические и инфекционные лечебные заведения. Это было связано со стремительным распространением «чумы XX века» – СПИДа, и требовалось срочное принятие диагностических и терапевтических мер.

Стоимость исследования

Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):

• гепатит 250 -900;
• вирусы – 250 -1000;
• ВИЧ – 250-350;
• глистные инвазии – 280 — 900;
• сифилис -150-250;
• грибковые инфекции 400-500.

Иммуноферментный анализ крови один из самых эффективных методов исследований множества вирусных патологий, паразитарных инфекций, онкологических патологий. Такое исследование как ИФА во многом облегчает постановку диагноза, однако этот анализ не должен интерпретироваться пациентом самостоятельно, заниматься расшифровкой должен только врач.

Автор статьи: Bacio

Оформление статьи: Лозинский Олег

Значение результатов теста

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

• иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
• IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
• IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

При получении положительных проб далее следует:

• если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
• повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
• при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

Диагностика ВИЧ методом ИФА

Как проводится ИФА ВИЧ? Все достаточно просто, но перед анализом придется соблюдать некоторые правила:

1. Не есть 12 часов до забора крови;
2. За пару дней до анализа не есть жирную пищу и пить спиртное;
3. 2 недели до исследования не принимать противовирусных препаратов (если это не несет прямой угрозы жизни).

От пациента не требуется ничего, только сдать кровь и ожидать результата. Скорость расшифровки составляет до 2 недель, в зависимости от загруженности лаборатории. В срочном порядке ответ можно получить через 2 часа, если имеется обоснование для спешки (это может быть необходимость немедленного хирургического вмешательства).

Преимущества метода ИФА на ВИЧ

Метод ИФА на ВИЧ является самым распространенным. Через этот этап проходят все, кто хоть раз усомнился в своем статусе. Стоит отметить, что погрешность имеет место быть, но она есть и при других методах.

К главным преимуществам иммуноферментного анализа традиционно относят:

• Дешевизну;
• Доступность и стабильность препаратов для проведения теста;
• Чувствительность реагентов;
• Возможность быстро получить результат анализа при необходимости;
• Минимальные требования к квалификации персонала.

Все вышеперечисленное означает, что такой анализ может позволить себе каждый, что его провести не сложно для медиков, что препараты не портятся и всегда в наличии в любой лаборатории.

Тест ИФА на ВИЧ 4 поколения

Современные диагностические центры предлагают не только стандартный тест. Тесты на ВИЧ 4 поколения точность которых гораздо выше на ранних стадиях, используются довольно широко на сегодняшний день.

Технические отличия метода описать простым языком непросто. Ферментный препарат, который используется для качественного анализа, имеет более сложный состав, благодаря чему имеет более высокую чувствительность и реагирует даже на минимальную концентрацию антител. Пациентам бросается в глаза и дороговизна такого анализа, но это оправдано, когда результаты стандартного анализа вызывают серьезные сомнения.

Тест 4 поколения на ВИЧ достоверность до 99% дает уже после 3 месяцев после контакта с вирусом. Максимально высокий уровень доверия по этому анализу можно проявить к отрицательному результату, его можно не проверять дополнительно, если, конечно, нет внешних проявлений заболевания ВИЧ и жалоб на самочувствие.

ИФА тест на ВИЧ старого образца, или 3 поколения, все же делается в первую очередь. Он стоит меньше, в некоторых клиниках проводится бесплатно.

Анализы при иммунологическом анализе крови методом ИФА

О том, какие бывают анализы крови с точки зрения иммунологической системы человека, мало кто знает, так эти анализы не так распространены. Как правило, такое исследование крови дает информацию о вирусе иммунодефицита в организме человека и является анонимной, так как проводится по желанию пациента.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Для забора используют взятую натощак из вены кровь, из которой для исследования методом центрифугирования получают сыворотку. Кроме этого, изучение сыворотки крови способно выявить ряд венерических заболеваний (сифилис, герпес, хламидиоз), а также все виды гепатита, корь, краснуху, паротит и токсоплазмоз.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Иммуноглобулины — это иммунные молекулы, способные связываться и нейтрализовать большинство инфекционных возбудителей и токсинов в организме. При этом важнейшей характеристикой иммуноглобулинов является их специфичность, то есть способность связываться с определенным антигеном. Именно это свойство используется для проведения анализа крови на иммуноглобулин.

Существует пять типов иммуноглобулинов, однако наиболее изученными являются иммуноглобулины А, М, и G. Иммуноглобулины М и G проявляют свою активность в крови. Иммуноглобулины А являются, своего рода, барьером на поверхности слизистых оболочек, так как присутствуют там в большом количестве.

Иммунологический анализ крови позволяет определять тип иммуноглобулинов, благодаря этому ИФА позволяет не только диагностировать заболевание, но и определить стадию данного и отслеживать динамику заболевания:

• в первые 2 недели заболевания обнаруживаются только иммуноглобулины А;
• со 2-й по 3-ю неделю заболевания в крови обнаруживаются иммуноглобулины А и М.;
• Сс3 по 4 неделю анализ крови на иммуноглобулин  определяются все три типа;
• при выздоровлении в крови пропадают иммуноглобулины М, а количество А и G снижается в 2 – 4 раза;
• при наличии хронического процесса в крови обязательно присутствуют иммуноглобулины G, иммуноглобулины М отсутствуют, иммуноглобулины А могут как присутствовать, так и отсутствовать.

Иммуноферментный анализ крови в паразитологии

Возможность применения ИФА в диагностике паразитарных заболеваний определяется специфическим иммуноглобулином E (IgE), который имеет тенденцию к повышению именно при этой группе заболеваний. Кроме того, иммуноглобулин Е является маркером атопических реакций связанных с аллергическими процессами. В крови он находится в незначительных количествах. Основная его локализация – слизистые оболочки, базофилы, маркофаги. Главная функция этого белкового комплекса заключается в защите слизистых оболочек организма. Но в тоже время он является участником иммунных реакций, направленных против паразитов. Активацией IgE «заведуют» эозинофилы и макрофаги. Это важный факт в сопоставлении данных анализа при установлении диагноза болезни.

ИФА применяется для обнаружения:

• круглых гельминтов (аскарид, остриц);
• острой и хронической формы описторхоза;
• трихинеллеза;
• наличия лямблий (как дополнительный анализ);
• форм лейшманиоза;
• амебиаза;
• содержания токсоплазм;

Важно: иммуноглобулины вырабатываются в организме в качестве антител к определенным антигенам. Поэтому даже при самой высокой специфичности анализа не исключаются погрешности в точности

При паразитарных заболеваниях процент вероятности составляет около 90%.

В заключение необходимо отметить, что современная иммунология постоянно находится в стадии развития, поиска новых методов диагностики и лечения заболеваний.

Степаненко Владимир, хирург

67, всего, сегодня

(54 голос., средний: 4,17 из 5)

Подготовка к исследованию

Необходимо правильно подготовиться, чтобы получить достоверные результаты после первого тестирования. Что для этого требуется:

• за сутки отказаться кофе, алкогольных напитков, жирных блюд, продуктов, насыщенных солью и пряностями;
• избегать в течение дня открытых солнечных лучей;
• при возможности не принимать препараты с противомикробным, противовирусным или антибактериальным действием;
• отказаться от чрезмерной двигательной активности, тяжелых физических нагрузок в течение суток перед тестированием.

Для ИФА сдают кровь преимущественно из локтевой вены в утреннее время. Если обследуемый человек не должен по медицинским показаниям пропускать очередной прием пищи, то тестирование выполняется спустя 3-5 часов. Сотрудники лабораторий рекомендуют не курить за час до сдачи крови, согласовать медикаментозную терапию хронических заболеваний с лечащим врачом.

Забор крови проводится лаборантом или врачом, который прибыл на дом пациента для обследования или выполнения платного тестирования. Он просит человека согнуть руку в локте, накладывает жгут. После сжимания и разжимания кулака вена заполняется кровью. Врач обрабатывает место прокола антисептическим раствором, чтобы исключить инфицирование тканей в местах введения иглы. При заборе биоматериала используется стерильный шприц.

Важно: Для тестирования на коронавирус методом ИФА требуется 10-20 мл крови из локтевой вены.

Расшифровка результатов теста

Расшифровкой результатов занимается только обученный медицинский персонал. Результатом будет однозначный ответ — найдено ли искомое вещество в биологической жидкости или нет.

Анализируемые показатели

Обычно при оценке результатов анализируют следующие показатели.

• Антитела класса М. Наличие данного белкового соединения говорит о том, что в организме протекает острый инфекционный процесс. Антиген может указывать на хроническую инфекцию.
• Иммуноглобулины класса А (IgA). Присутствие таких веществ говорит о скрытых инфекциях, которые не могут быть диагностированы по IgM.
• Одновременное присутствие в анализах иммуноглобулинов классов А и М. Если в биологической жидкости обнаружены два типа веществ, это может говорить об обострении инфекции.
• Иммуноглобулины класса G. Такие белковые соединения появляются в организме при переходе активной фазы в хроническую, либо диагностируют выздоровление и появление иммунитета к антигену.

IgG и IgM обычно вместе не встречаются.

Варианты результатов анализа

Результат, как правило, представлен данными, занесёнными в таблицу, в которой перечисляются все виды антител и полученный результат. Он либо отрицательный, либо положительный. В случаях неточности может указываться количество антител, которое говорит о слабоположительной или слабоотрицательной реакции.

Кроме этого, в результатах анализов показано значение индекса авидности антител (характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами). Этот показатель выражается в процентах и показывает временной промежуток, который прошёл от начала заражения. Чем показатель выше, тем больше времени прошло.

Почему результат может быть недостоверным

Иммуноферментный анализ – один из самых высокоточных и очень редко даёт погрешности. Тем не менее, они случаются.

Недостоверность ИФА может означать следующее:

• нарушены правила забора биологической жидкости;
• кровь была взята в вечернее время;
• перед забором крови пациент плотно поел;
• за несколько недель до исследования был начат терапевтический курс лечения антибиотиками либо противовирусными препаратами.

Особенности проведения теста и расшифровка

В большинстве случаев для иммуноферментного исследования берется кровь больного. Но при определенных обстоятельствах может осуществляться забор тканей с поверхности стекловидного тела. У беременных женщин ИФА диагностика может проводиться посредством изучения состава околоплодных вод.

Забор крови выполняется с использованием шприца, при этом материал для исследования берут, как правило, из вены, походящей на внутренней стороне локтевого сгиба. Пациент при этом должен находиться в расслабленном состоянии, в положении сидя.

Особенности подготовки

Анализ крови на ИФА требует выполнения определенных подготовительных процедур:

• отказа от завтрака в день теста;
• прекращения приема препаратов, разжижающих кровь, и других фармакологических средств, способных повлиять на результаты (после предварительной консультации у лечащего врача);
• воздержания от курения в день исследования;
• отказа от употребления спиртного за день до забора крови;
• исключения приема наркотических веществ (в том числе, и медпрепаратов, которые их содержат).

Соблюдение таких правил подготовки к иммунохимическому анализу крови исключает возможность искажения данных.

Трактовка данных

Результаты исследования выдаются пациенту на руки, после чего он проходит повторную консультацию у специалиста. Расшифровка данных ИФА может быть положительной или отрицательной. При этом в расчет также принимаются цифры, обозначающие уровень иммуноглобулинов (если таковые были обнаружены).

Если ИФА отрицательный, это может говорить об отсутствии патологических процессов, либо о начальной фазе их развития. Также «минусовый» результат исследования наблюдается при выздоровлении пациента после пройденного курса терапии. Но подобные данные можно получить только по истечении определенного промежутка времени (1 – 2 месяцев).

Если иммуноглобулины IgA и IgM в крови отсутствуют, а анализ ИФ показал положительный результат на IgG, это может свидетельствовать о том, что у пациента сформировался стойкий иммунитет к определенному виду антигенов. Подобное происходит при иммунизации.

При высокой концентрации IgM на фоне отсутствия IgG и IgA речь может идти о воспалительном процессе, протекающем в острой фазе.

Что означает, если ИФА положительный для всех видов иммуноглобулинов? В подобных случаях речь может идти о рецидиве инфекционной патологии. При этом возникновение антител фиксируется только при острой фазе хронической болезни.

При переходе заболевания в фазу затухания показатели IgM будут отрицательными. А вот ИФА на IgG и IgA будет положительным.